Наши услуги
О нас
Доклинические исследования
Регламент
Видео доклинические исследования
Клинические исследования
Регламент
Клинические исследования видео
Набор добровольцев
Архив исследований
Набор пациентов
Новости медицины
Интервью
Архив новостей
Контакты
Вакансии
НАВЕРХ

Регламент

S9 Доклиническая оценка противоопухолевых лекарственных средств

МЕЖДУНАРОДНАЯ КОНФЕРЕНЦИЯ ПО ГАРМОНИЗАЦИИ ТЕХНИЧЕСКИХ ТРЕБОВАНИЙ К РЕГИСТРАЦИИ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ ДЛЯ ЧЕЛОВЕКА

Гармонизированное трехстороннее руководство ICH

Доклиническая оценка противоопухолевых лекарственных средств

S9

Действующая версия 4 этапа

от 29 октября 2009 г.

 

 

Данное Руководство было разработано соответствующей Экспертной рабочей группой ICH, оно было представлено на рассмотрение регуляторным органам в рамках процесса ICH. На 4 этапе процесса финальный проект рекомендован для принятия регуляторными органами Европейского Союза, Японии и США.

 

S9
История документа















Первая кодификация История Дата
S9 Одобрение Руководящим комитетом в рамках 2 этапа и вынесение на общественное обсуждение. 13 ноября 2009 г.

Текущая версия 4 этапа








S9 Одобрение Руководящим комитетом в рамках 4 этапа и рекомендация к принятию тремя регуляторными органами ICH. 29 октября 2009 г.

 

Доклиническая оценка противоопухолевых лекарственных средств

Гармонизированное трехстороннее руководство ICH

По достижении 4 этапа процесса ICH в рамках встречи Руководящего комитета ICH 29 октября 2009 г., данное руководство рекомендовано к принятию тремя регуляторными органами ICH

 

 

 

Доклиническая оценка противоопухолевых лекарственных средств

1. Введение

1.1 Цели руководства

Цель данного руководства – предоставить информацию, содействующую разработке дизайна целесообразной программы доклинических исследований для разработки противоопухолевых лекарственных средств. В руководстве представлены рекомендации по доклинической оценке в поддержку разработки противоопухолевых препаратов в рамках клинических исследований для лечения пациентов с запущенными формами заболеваний при ограниченном арсенале терапевтических решений.

Данное руководство направлено на регуляцию и ускорение разработки противоопухолевых препаратов и защиту пациентов от излишних нежелательных эффектов при этом избегая использования чрезмерного количества животных в соответствии с принципами 3R (replacement/reduction/refinement/ - замена/адекватность/уменьшение боли) и другими ресурсами.

По мере необходимости при разработке противоопухолевых препаратов следует опираться на принципы, описанные в других руководствах ICH. Особые ситуации, в которых рекомендации по доклиническим исследованиям отличаются от других рекомендаций, описаны в данном документе.

1.2 Справочная информация

Поскольку злокачественные опухоли угрожают жизни, характеризуются высоким уровнем смертности, а существующие средства терапии имеют ограниченную эффективность, существует потребность в ускорении выведения на рынок новых эффективных противоопухолевых препаратов.

До сих пор не существовало принятых на международном уровне целей или рекомендаций относительно дизайна и проведения доклинических исследований в рамках программы разработки противоопухолевых препаратов в клинических исследованиях при лечении пациентов с распространенным заболеванием и ограниченным набором терапевтических вариантов. Доклиническая оценка проводится с целью:

1)  определения фармакологических свойств лекарственного препарата;

2)  установления безопасной начальной дозы при первом воздействии на человека и

3) определения токсикологического профиля лекарственного вещества (например, идентификация целевых органов, взаимосвязь воздействие-ответ и обратимость эффектов).

При разработке противоопухолевых препаратов в клинических исследованиях зачастую принимают участие пациенты с прогрессирующим заболеванием либо неизлечимые больные. Кроме того, уровень доз в клинических исследованиях часто находится на грани либо превышает уровень, при котором развиваются нежелательные явления. Поэтому типы, время и гибкость дизайна доклинических исследований противоопухолевых препаратов зачастую отличается от параметров доклинических исследований других лекарственных средств.

1.3 Область применения

В данном руководстве содержится информация о лекарственных средствах, предназначенных для лечения онкологических заболеваний у пациентов с серьезными или неизлечимыми опухолями. В рамках данного руководства пациенты этой категории названы пациентами с распространенными формами рака. Руководство распространяется как на синтетические препараты, так и на биотехнологические лекарственные средства (биопрепараты) с любым путем введения. Данное руководство описывает типы и сроки проведения доклинических исследований в процессе разработки противоопухолевых препаратов у пациентов с распространенными формами рака и при необходимости ссылается на другие руководства. В руководстве представлены минимальные требования к клиническим исследованиям с участием пациентов с распространенными формами рака, рефрактерными либо устойчивыми к имеющимся вариантам терапии, либо с формами. В отношении которых существующая терапия неэффективна. Данных доклинических исследований I фазы либо клинических исследований I фазы обычно бывает достаточно для перехода к исследованиям II фазы и терапии второй либо первой линии у пациентов с распространенными формами рака. В руководстве также описаны дополнительные доклинические данные, которые необходимы в процессе клинической разработки препарата, предназначенного для пациентов с распространенными формами рака.  Когда противоопухолевый препарат проходит дальнейшие исследования в популяции пациентов с онкологическими заболеваниями с предположительно высокой выживаемости (например, пациентов, получающих препарат длительным курсом для снижения риска повторного проявления рака), рекомендации к срокам проведения дополнительных исследований зависят от существующих данных доклинических и клинических исследований и от характера токсических реакций.

Данное руководство не распространяется на лекарственные препараты, предназначенные для профилактики опухолей, лечения симптомов либо побочных эффектов химиотерапевтических препаратов, исследования, проводимые с участием здоровых добровольцев, вакцины, клеточную либо генную терапию. Если в клинические исследования включают здоровых добровольцев, следует руководствоваться принципами, изложенными в руководстве ICH M3. Радиофармацевтические препараты в данном руководстве не рассматриваются, но некоторые принципы распространяются  и на предмет данного руководства.

1.4 Общие принципы

Разработка каждого нового лекарственного препарата требует проведения исследований с целью определения характеристик фармакологических и токсикологических свойств препарата в контексте предполагаемого применения у человека. Модификация «стандартного» протокола доклинических исследований оправдана с целью рассмотрения новых характеристик лекарственного средства либо нового способа применения у человека.

Процесс производства может измениться в ходе разработки. Однако активное лекарственное вещество, которое применяют в доклинических исследованиях, должно быть надлежащим образом описано и должно давать достаточное представление об активном веществе, используемом в клинических исследованиях.

В целом Биомедицинские исследования, проводимые без участия человека в качестве субъекта.доклинические исследования безопасности, проводимые в рамках разработки лекарственного средства, должны проводиться в соответствии с принципами надлежащей лабораторной практики.

2. Исследования, подтверждающие доклиническую разработку

2.1 Фармакология

До исследований I фазы должна проводиться предварительная характеристика механизма действия и влияния схемы приема, а также противоопухолевой активности препарата. Соответствующие модели следует выбирать в зависимости от цели и механизма действия, при этом лекарственный препарат не обязательно исследовать на тех же типах опухоли, что и при проведении клинической оценки.

Данные исследования обеспечивают:

- Доказательства принципа на доклиническом уровне;

- Данные о схеме приема и увеличении доз;

- Информацию о выборе вида исследуемых животных;

- Помогают при выборе доз и экспериментальных биомаркеров и

- При необходимости обоснование комбинаций с другими лекарственными средствами.

Понимание вторичных свойств фармакодинамики лекарственного средства может помочь при оценке безопасности для человека. Эти свойства могут быть изучены соответствующим образом.

2.2 Фармакологические аспекты безопасности

Оценка воздействия препарата на функции жизненно-важных органов (включая сердечно-сосудистую, дыхательную и центральную нервную систему) должна быть проведена до начала клинических исследований. Подобные параметры могут быть включены в исследования общей токсикологии. Подробные клинические наблюдения после введения дозы и соответствующие электрокардиографические исследования животных, не относящихся к отряду грызунов, обычно достаточны. Проведение самостоятельных фармакологических исследований безопасности для поддержки исследований с участием пациентов с распространенными формами рака не приветствуется. В случаях, когда обнаруживались значительные проблемы, которые могли привести к появлению существенных дополнительных рисков для пациентов в клинических исследованиях, следует рассмотреть возможность проведения соответствующих фармакологических исследований безопасности, описанных в разделе ICH S7A и / либо S7B. При отсутствии риска необходимости в подобных исследованиях для поддержки клинических исследований либо выведения на рынок, нет.

2.3 Исследования фармакокинетики

Оценка ограниченных фармакокинетических параметров (например, пиковые уровни плазмы / сыворотки в крови, площадь под кривой (AUC) и период полувыведения) у животных, используемых для проведения доклинических исследований, может обусловить выбор дозы, схему и повышение доз в рамках исследований I фазы. Дополнительную информацию о всасывании, распределении, метаболизме и выведении лекарственного препарата из организма животных как правило получают параллельно с клинической разработкой.

2.4 Исследования общей токсичности

Основная цель клинических исследований I фазы с участием пациентов с распространенными формами рака заключается в оценке безопасности лекарственного средства. Оценка в рамках исследований I фазы может включать введение доз до уровня максимально переносимой дозы (МПД) и дозолимитирующей токсичности (ДЛТ). Токсикологические исследования, направленные на достижение уровня дозы, не вызывающего видимых нежелательных явлений (NOAEL) либо дозы, не вызывающей нежелательных явлений (NOEL) не считаются обязательными для подкрепления клинического использования противоопухолевого препарата. Поскольку на Мера вредного воздействия исследуемого материала на организм в условиях однократного или многократного введения.токсичность препарата в большой степени может повлиять схема применения, в рамках токсикологических исследований следует проводить оценку максимально приближенной схемы клинического применения препарата. Более подробно данная тема раскрыта в Разделах 3.3 и 3.4.

Оценка потенциальной возможности восстановления организма после возникновения токсичности должна быть проведена для понимания обратимости либо необратимости серьезных нежелательных эффектов. Исследование, включающее последний период без введения препарата требуется в случае, если тяжелую токсичность при приблизительном уровне клинического воздействия и восстановление невозможно спрогнозировать методом научной оценки. Подобная научная оценка может включать степень и тяжесть патологического нарушения и восстановительную способность системы органов, показывающей эффект. Если требуется проведение исследования восстановления, его данные должны учитываться в процессе клинической разработки препарата. Демонстрация полного восстановления при этом необязательна.

Для синтетических препаратов общие токсикологические испытания обычно проводятся на грызунах и других животных. В некоторых случаях, в индивидуальном порядке, могут потребоваться альтернативные подходы (например, для генотоксических препаратов, действие которых направлено на быстро делящиеся клетки, исследование токсичности при многократном введении одному виду грызунов может оказаться достаточным, при условии, что выбранный вид хорошо подходит для проведения такого исследования). Для биофармацевтических препаратов количество изучаемых биологических видов можно узнать в руководстве ICH S6.

Оценка токсикокинетических свойств должна быть проведена надлежащим образом.

2.5 Токсическое воздействие на репродуктивную функцию

Эмбриофетальный токсикологический анализ проводится для оценки потенциального риска для развивающегося плода или эмбриона при применении препарата у женщин детородного возраста. Исследования эмбриофетальной токсичности противоопухолевых препаратов должны проводиться при подаче заявки на государственную регистрацию, однако эти исследования не являются обязательными в рамках программы клинических исследований препаратов, предназначенных для пациентов с распространенными формами рака. Также проведение подобных исследований необязательно при подаче на регистрацию препаратов с генотоксическим действием, направленным на быстро делящиеся клетки (например, клетки слизистой кишечника, костного мозга), в рамках исследований общей токсичности, либо принадлежащие к классу препаратов, оказывающих токсическое действие на внутриутробное развитие.

В случае синтетических препаратов эмбриофетальные токсикологические исследования обычно проводятся на двух видах животных в соответствии с рекомендациями, представленными в ICH S5(R2). В случаях, когда исследование эмбриофетальной токсичности подтверждает наличие эмбриофетальной летальности либо тератогенности, как правило, требуется подтверждающее исследование на втором виде животных.

В случае биофармацевтических препаратов исследования на одном фармакологически значимом биологическом виде бывает достаточно. Оценка может проводиться путем оценки токсичности в период органогенеза  либо в рамках исследований, дизайн которых описан в руководстве ICH S6. Альтернативные подходы могут применяться при условии их научной обоснованности. Кроме того, альтернативные подходы могут включать оценку литературы, оценку трансплацентарной передачи, прямые либо косвенные эффекты биофармацевтического препарата, а также другие факторы.

Исследования фертильности и раннего эмбрионального развития не обязательны в рамках программы клинических исследований либо  выведения на рынок лекарственных средств, предназначенных для лечения пациентов с распространенными формами рака. Информация по результатам исследований общего токсического воздействия лекарственных средств на репродуктивные органы лежит в основе оценки влияния препарата на фертильность

Пре- и постнатальные токсикологические исследования, как правило, не обязательны в рамках программы клинических исследований либо  выведения на рынок лекарственных средств, предназначенных для лечения пациентов с распространенными формами рака

2.6 Исследования генотоксичности

Исследования генотоксичности необязательны в рамках программы клинических исследований лекарственных средств, предназначенных для лечения пациентов с распространенными формами рака. Исследования генотоксичности следует проводить при выведении препарата на рынок (см. ICH S2). Принципы, изложенные в ICH S6, должны соблюдаться и в отношении биофармацевтических препаратов. В случае положительных результатов исследований может потребоваться анализ in vivo.

2.7 Исследования канцерогенности

Уместность исследования канцерогенности при оценке противоопухолевых препаратов обсуждается в руководстве ICH S1A. Исследования канцерогенности не проводятся для препаратов, предназначенных для лечения пациентов с распространенными формами рака.

2.8 Исследования иммунной токсичности

Для большинства противоопухолевых препаратов компоненты дизайна исследований общей токсикологии считаются достаточными для оценки иммунотоксического потенциала и при регистрации лекарственного средства. Для иммуномодулирующих препаратов дополнительные конечные точки (такие как иммунофенотипирование методом поточной цитометрии) могут быть включены в дизайн исследования.

2.9 Исследование фототоксичности

Начальная оценка фототоксического потенциала должна проводиться до исследования I фазы на основании фотохимических свойств препарата и информации о других препаратах аналогичного класса. Если оценка этих данных указывает на потенциальный риск, в рамках исследований в амбулаторных условиях должны предприниматься соответствующие меры для защиты. Если оценку риска фототоксичности на основании данных доклинических либо клинических исследований провести не удастся, до выведения препарата на рынок следует провести оценку фототоксичности в соответствии с принципами, изложенными в руководстве ICH M3.

3. Данные доклинических исследований, используемые при разработке дизайна клинических исследований и выведения препаратов на рынок

3.1 Начальная доза при первом введении препарата человеку

Цель выбора начальной дозы состоит в том, чтобы установить дозу, оказывающую фармакологический эффект и относительно безопасную для применения. Начальная доза должна быть научно обоснована с учетом всех доступных доклинических данных (например, фармакокинетических, фармакодинамических, данных о токсичности), ее выбор может быть основан на различных подходах (см. Примечание 2). Для большинства синтетических препаратов системного введения  межвидовой пересчет доз для животных к эквивалентной дозе для человека, как правило, основано на нормализации по площади поверхности тела. Для синтетических препаратов и биофармацевтических препаратов целесообразен межвидовой пересчет на основе массы тела, площади под кривой и других параметров оценки системной концентрации.

В случае биофармацевтических препаратов с агонистическими свойствами для иммунной системы следует рассмотреть возможность выбора начальной дозы с использованием содержания, вызывающего минимальный ожидаемый биологический эффект (MABEL).

3.2 Повышение доз и максимальные дозы в клинических исследованиях

В целом максимальная доза либо уровень воздействия, изучаемые в доклинических исследованиях, не ограничивают возможности повышения дозы либо максимальной изучаемой дозы в клинических исследованиях с участием пациентов с онкологическими заболеваниями. В случае, когда в доклинических токсикологических исследованиях наблюдается крутой наклон кривой ответа на вводимую дозу либо воздействие в отношении тяжелой токсичности в доклинических токсикологических исследованиях, либо в случае отсутствия предшествующего маркера тяжелой токсичности, следует рассматривать меньшие интервалы (частичны интервалы вместо удвоения доз).

3.3 Продолжительность и график проведения токсикологических исследований, подкрепляющих начальные клинические исследования

В клинических исследованиях I фазы лечение может быть продолжено в зависимости от ответа пациента и в данном случае новые токсикологические исследования для изучения продолжения терапии после окончания сроков проведения токсикологических исследований не требуются.

Следует надлежащим образом разработать дизайн доклинических исследований с учетом различных схем дозирования, которые могут быть использованы в начальных клинических исследованиях. Четкая клиническая схема не всегда будет соблюдаться в рамках токсикологического исследования, но информации, полученная в результате исследований токсичности, может оказаться достаточно для поддержания клинической дозы и схемы и выявления потенциальной токсичности. Например, одним из факторов, которые могут быть рассмотрены, является период полувыведения исследуемого препарата и предполагаемый (либо известный) период полувыведения у человека. Другие факторы могут включать оценку концентрации, профиль токсичности, насыщение рецепторов и т.д. В Таблице 1 представлены примеры схем доклинической оценки, часто применяемые в рамках программы  фармацевтической разработки противоопухолевых препаратов, и могут быть применимы к синтетическим или биофармацевтическим препаратам. В случаях, в которых существующие данные токсикологических исследований не подтверждают целесообразности изменения клинических схем, дополнительного токсикологического исследования на одном виде животных, как правило, бывает достаточно.

3.4 Продолжительность токсикологических исследований в рамках дальнейшей клинической разработки и выведения на рынок

Данных доклинических исследований в рамках I фазы и клинических данных I фазы разработки как правило, бывает достаточно для перехода к исследованиям II фазы и к исследованиям второй или третьей линии терапии пациентов с распространенными формами рака. В рамках непрерывной разработки противоопухолевого препарата у пациентов с распространенными формами рака  результаты исследований многократных доз продолжительностью 3 месяца в соответствии с предполагаемой клинической схемой терапии должны предоставляться до начала исследований III фазы. Для большинства лекарственных средств, предназначенных для лечения пациентов с распространенными формами рака при выведении на рынок достаточно проведения доклинических исследований продолжительностью 3 месяца.

При рассмотрении вопроса о внесении изменений в график клинических исследований должна проводиться оценка существующих клинических данных для обоснования подобных изменений. Если клинических данных недостаточно для поддержания изменения схемы, следует рассмотреть возможность учета факторов, обсуждаемых в Разделе 3.3.

3.5    Комбинация лекарственных средств

В случая, когда предполагается комбинированное применение нескольких лекарственных средств, они должны быть надлежащим образом изучены по отдельности в рамках токсикологических исследований. Данные, дающие обоснование для комбинации, должны быть предоставлены до начала клинического исследования. В целом токсикологические исследования, в которых изучается безопасность комбинаций лекарственных средств, предназначенных для лечения пациентов с распространенными формами рака, не обязательны. Если профиль токсичности препарата у человека в достаточной степени охарактеризован, проведения доклинического исследования комбинации препаратов, как правило, не требуется. В исследованиях препаратов, один или несколько из которых находятся на ранней стадии разработки (т.е. отсутствуют характеристики профиля токсичности для человека), должно быть проведено фармакологическое исследование, подтверждающее обоснование комбинации. В данном исследовании должны быть представлены данные о повышенной активности в отсутствие существенного роста токсичности на основании ограниченных конечных точек безопасности, включая смертность, клинические признаки заболевания и массу тела. На основании существующей информации надлежит определить, насколько обосновано проведение специального токсикологического исследования лекарственной комбинации.

3.6 Доклинические исследования в рамках программы доклинических исследований в популяции педиатрических пациентов

Общая парадигма исследования большинства противоопухолевых препаратов при лечении детей предполагает в первую очередь определение относительно безопасных дозировок в популяции взрослых пациентов и затем исследование части дозы в начальных клинических исследованиях с участием детей. Рекомендации в отношении доклинических исследований, изложенные в других частях данного документа, также применимы и к данной категории пациентов. Исследования на молодых животных обычно не проводят в рамках программ клинических исследований противоопухолевых препаратов в популяциях педиатрических пациентов. Проведение исследований на молодых животных обосновано только если имеющихся данных о безопасности для человека и данных проведенных исследований на животных недостаточно для оценки безопасности в интересующей группе педиатрических пациентов.

4. Другие факторы

4.1 Конъюгированные препараты

Конъюгированные препараты – это лекарственные вещества, ковалентно связанные с молекулами-носителями, например, белками, липидами или сахарами. Безопасность конъюгированного материала – вопрос первоочередного значения. Безопасность конъюгированного материала, включая связывающий агент, в меньшей степени требует оценки. Должны быть приведены данные о стабильности конъюгата в плазме крови исследуемого вида животного и человека. В рамках токсикокинетической оценки должны быть изучены конъюгированный и неконъюгированный компоненты после введения конъюгированного материала.

4.2 Липосомные препараты

Полная оценка липосомного продукта не требуется, если не инкапсулированный материал в достаточной степени охарактеризован. Оценка безопасности должна включать токсикологическую оценку липосомного продукта и ограниченную оценку некапсулированного вещества и носителя (например, в одном из рукавов токсикологического исследования). Описанный здесь принцип также распространяется на другие сходные носители. Должна быть проведена соответствующая токсикокинетическая оценка. По возможности должна быть проведена оценка липосомного продукта и свободного вещества после введения липосомного продукта.

4.3 Оценка метаболитов лекарственных средств

В некоторых случаях метаболиты, обнаруженные у человека, не проходили оценки в доклинических исследованиях. Для подобных метаболитов отдельной оценки на пациентах с распространенными формами рака не требуется.

4.4 Оценка примесей

Растет понимание того, что стандарты в отношении примесей основаны на минимальном риске, что отражено в руководствах ICH Q3A и Q3B. Превышение установленных предельных значений для примесей в указанных руководствах ICH актуально и для противоопухолевых препаратов, поэтому соответствующее обоснование должно быть представлено в документах на государственную регистрацию. Обоснование должно включать указание заболевания и популяции пациентов, характеристик исходного препарата (фармакологические свойвства, генотоксичность и канцерогенный потенциал и т.д.), продолжительность терапии и воздействие снижения содержания примеси на процесс производства. Кроме того, квалификационная оценка могла учитывать дозу или концентрацию, исследуемую в доклиническом исследовании относительно клинических уровней. В отношении генотоксических примесей применялось несколько подходов к установлению предельных значений их содержания на основании роста пожизненного риска развития онкологического заболевания. Подобные границы неприменимы к препаратам, предназначенным для лечения пациентов с распространенными формами рака, и вышеназванные обоснования следует учитывать при установлении более высоких предельных значений. Примеси, которые одновременно являются метаболитами, присутствующими в исследованиях с участием животных и/или человека, в целом считают в достаточной степени квалифицированными.

 

Таблица 1: Примеры схем терапии противоопухолевыми лекарственными средствами в рамках программы начальных клинических исследований




































Клиническая схема применения Примеры схемы терапии в рамках доклинических исследований1,2,3,4
Один раз в 3-4 недели Одна доза
Ежедневно в течение 5 дней через каждые 3 недели Ежедневно в течение 5 дней
Ежедневно в течение 5-7 дней через неделю Ежедневно в течение 5-7 дней через неделю (2-цикла)
Один раз в неделю в течение 3 недель с перерывом в 1 неделю Один раз в неделю в течение 3 недель
Два или три раза в неделю Два или три раза в неделю  в течение 4 недель
Ежедневно Ежедневно в течение 4 недель
Еженедельно Один раз в неделю – 4-5 доз

 

1 В таблице 1 описана Фаза дозирования. Сроки проведения оценок токсичности в доклинических исследованиях должны быть научно обоснованы с учетом ожидаемого профиля токсичности и схемы клинического применения. Так следует проводить умерщвление животных вскоре после фазы дозирования для определения ранней токсичности и в более поздние соки для анализа поздней токсичности.

2 Дальнейшее обсуждение гибкости в связи со схемой клинического применения и доклинических исследований токсичности представлено в Разделе 3.3.

3 Схемы терапии, описанные в таблице, не учитывают периода восстановления (см. Раздел 2.4 и Примечание 1 в отношении восстановления).

4 Схемы терапии, описанные в данной таблице, должны быть соответствующим образом модифицированы в отношении молекул с продленным фармакодинамическим эффектом, более длительным периодом полувыведения либо вероятностью возникновения анафилактических реакций. Кроме того, следует учитывать потенциальное влияние иммуногенности (см. ICH S6).

5. Примечания

1. В исследованиях, проводимых на животных, не относящихся к отряду грызунов, группы доз обычно состоят минимум из 3 животных каждого пола в группе, плюс 2 дополнительных животных каждого пола в каждой группе для анализа восстановления, если это целесообразно (см. Раздел 2.4). Как правило, следует использовать животных обоих полов, а в случае, когда это требование не выполняется, должно быть представлено соответствующее обоснование.

2. Общий подход для многих синтетических препаратов заключается в выборе стартовой дозы на уровне 1/10 от тяжелой токсической дозы у 10% животных (СТД 10) у грызунов. В случае, если наиболее подходящим биологическим видом является животное, не относящееся к отряду грызунов, в качестве начальной дозы может быть использована доза, составляющая 1/6 от максимальной дозы, не вызывающей тяжелых токсических реакций (HNSTD). HNSTD – максимальный уровень дозы, не приводящий к летальности, угрожающей жизни токсичности либо необратимым результатам исследований.