Оценка влияния препаратов на гиперчувствительность замедленного типа
Оценка влияния препаратов на гиперчувствительность замедленного типа
О состоянии клеточного иммунитета животных после введения им фармакологических препаратов можно судить по способности мышей к индукции реакции гиперчувствительности замедленного типа ( ГЗТ) к эритроцитам барана (ЭБ) и к тринитробензолсульфоновой кислоте (ТНБС). Использование двух разных антигенов позволяет с большей вероятностью выявить стимулирующий или ингибирующий эффект препаратов, так как эти реакции различаются по своей интенсивности (очень высокая в случае ТНБС). При использовании только одного антигена, предпочтение следует отдать ТНВС в силу высказанных выше причин.
По окончании курса введения препарата мышей-самцов (CBA x C57BL/6)F1 иммунизируют подкожно эритроцитами барана ( 2 х 10
8 ) в межлопаточную область или 10 мМ раствором ТНВС (0,2 мл ) в основание хвоста. Вторую (разрешающую) инъекцию антигена производят на 5 сутки в подушечку задней лапы -"опытная лапа" (50 мкл суспензии ЭБ, содержащей 10
8 клеток) или на 6 сутки (50 мкл 10 мМ раствора ТНБС). В контралатеральную лапу вводят 50 мкл стерильного физиологического раствора ("контрольная лапа"). Результаты реакции регистрируют через 24 ч путём определения массы "опытной" и "контрольной" лап. Индекс реакции для каждого животного определяют по формуле:
где Моп и Мк - масса "опытной" и "контрольной" лап.
При статистической обработке определяют среднюю арифметическую показателей и стандартную ошибку. Достоверность различий - по критерию t Стьюдента.
Список литературы:
Хаитов Р.М., Атауллаханов Р.И., Иванова А.С. и др. Методические указания по оценке иммунотоксического действия фармакологических веществ. — М., 2000.