Наши услуги
О нас
Доклинические исследования
Регламент
Видео доклинические исследования
Клинические исследования
Регламент
Клинические исследования видео
Набор добровольцев
Архив исследований
Набор пациентов
Новости медицины
Интервью
Архив новостей
Контакты
Вакансии
НАВЕРХ

Регламент

Оценка фагоцитарной активности перитонеальных макрофагов

Оценка фагоцитарной активности перитонеальных макрофагов


Для фагоцитоза можно использовать различные частицы (меченные эритроциты, дрожжевые тельца, частицы латекса и др). Здесь приводится описание фагоцитоза частиц коллоидной туши.

По окончании введения мышам исследуемого препарата через 24 часа оценивают у них фагоцитарную активность перитонеальных макрофагов по интенсивности захвата ими частиц туши, введённой животным внутрибрюшинно в виде 0,05% суспензии в объёме 2 мл. Через 10 мин брюшную полость промывают 5 мл изотонического раствора хлорида натрия. Полученные таким образом клетки перитонеального экссудата (КПЭ) трижды отмывают, ресуспендируют в 1-2 мл физиологического раствора, подсчитывают концентрацию ЯСК и процент фагоцитирующих клеток. Далее клетки осаждают центрифугированием, супернатант удаляют, а осадок КПЭ лизируют дистиллированной водой. Лизаты КПЭ затем помещают в плоскодонные планшеты и определяют с помощью спектрофотометра "Multiscan MCC 340" при  длине волны равной 620 нм оптическую плотность, отражающую количество туши, поглощённой перитонеальными фагоцитами. Результаты выражают в условных единицах, отражающих оптическую плотность лизата КПЭ, соотнесенную с количеством фагоцитирующих клеток.

Исследования позволяют оценить:

- концентрацию и количество ядросодержащих клеток в ПЭ;

- процент и количество фагоцитирующих клеток в ПЭ;

- суммарное количество туши , поглощенной КПЭ;

- количество туши , поглощенной одним фагоцитом (фагоцитарный индекс).

Список литературы:

Хаитов Р.М., Атауллаханов Р.И., Иванова А.С. и др. Методические указания по оценке иммунотоксического действия фармакологических веществ. — М., 2000.