Наши услуги
О нас
Доклинические исследования
Регламент
Видео доклинические исследования
Клинические исследования
Регламент
Клинические исследования видео
Набор добровольцев
Архив исследований
Набор пациентов
Новости медицины
Интервью
Архив новостей
Контакты
Вакансии
НАВЕРХ

Регламент

Реакция гиперчувствительности "замедленного" типа на мышах

Реакция гиперчувствительности "замедленного" типа на мышах


Известно, что интенсивность реакций гиперчувствительности замедленного типа (ГЗГ) к химическим соединениям и их длительность зависят от сроков формирования и сочетанного действия различных субпопуляций Т-супрессоров, подавляющих ГЗТ. Поэтому при индукции ГЗТ путем введения мышам химических аллергенов в полном адъюванте Фрейнда (ПАФ), при котором не происходит формирования Т-супрессоров, возможно усиление кожных аллергических реакций и выявление аллергенных свойств даже слабых химических аллергенов. Опыты проводят на не линейных мышах, массой 18-20 г. Мышей сенсибилизируют однократно, внутрикожно, в основание хвоста, 60 мкл эмульсии препарата в ПАФ, дозой эквивалентной 10 Мм раствору в ПАФ в соотношении 1:1. Для приготовления такой эмульсии используют раствор Хенкса pH 7,5.

Для выявления сенсибилизации через 5 суток мышам в подушечку задней лапы вводят 40 мкл 10 мМ раствора тест-препарата в растворе Хенкса. Через 6-22-24 часа после тестирования измеряют величину отека с помощью инженерного микрометра МК-0-25. Разница в толщине обеих лапок характеризует величину отека, по которой можно судить об интенсивности реакции ГЗТ.

Контрольных животных сенсибилизируют эмульсией ПАФ с раствором Хенкса по той же схеме, что в опыте. В каждой группе должно быть не менее 10 животных. В том случае, если тест-препарат становится аллергеном в процессе метаболизма, например пенициллин, тестирование проводят максимальной концентрацией вещества, эмульгированного в неполном адъюванте Фрейнда (НАФ). Учет реакции проводят через 48-72 часа.

Приготовление полного адъюванта Фрейнда (ПАФ):

- 1 мл ланолина;

- 3 мл вазелинового масла;

- 5 мг убитой прогреванием вакцины БЦЖ;

- 50 мкл твина-20;

- 0,5 мл дистиллированной воды.

Неполный адъювант Фрейнда (НАФ): те же самые компоненты, за исключением убитой прогреванием вакцины БЦЖ.

Список литературы


1. Черноусов А.Л. Гигиена труда и профессиональные заболевания, N 6, 1987, с. 45-48.


2. Оценка аллергизирующих свойств фармакологических средств. Методические рекомендации N 98/300