I. Общие положения
1. В настоящих Требованиях представлены указания по проведению валидации биоаналитических методик, использовавшихся для определения концентрации действующего вещества в биологических жидкостях (матрицах), полученных по результатам токсикокинетических исследований и всех фаз клинических исследований. Поскольку методики связывания лиганда существенно отличаются от хроматографических аналитических методов, для валидации полимерсвязывающих методик (например, со связыванием лигандов) применяются отдельные правила, описанные в разделе V настоящих Требований. В настоящих Требованиях описаны условия, при которых в дополнение к полной валидации биоаналитической методики необходимо провести частичную или перекрестную валидацию.
2. Для целей настоящих Требований используются понятия, которые означают следующее: «активные образцы» (incurred samples) – испытуемые образцы, полученные от субъектов или животных, которым вводили лекарственный препарат;
«анализируемое вещество» (analyte) – отдельное химическое соединение, подлежащее количественному определению, может представлять собой неизмененное действующее вещество, биологическую молекулу или ее производное, метаболит и (или) продукт деградации в биологическом образце;
«аналитическая методика» (analytical procedure) – подробное описание каждого этапа и способа проведения анализа;
«аналитический диапазон» (
Совокупность операций, устанавливающих соотношение между значением величины, полученной используемым прибором и соответствующим значением величины, определяемой с помощью эталона.calibration range) – интервал между высокой и низкой концентрацией (содержанием) анализируемого вещества в образце (включая указанные концентрации), для которых показано, что аналитическая методика удовлетворяет требованиям по прецизионности, правильности и постоянству функции отклика;
«аналитический цикл» (analytical run) – полный комплект испытуемых образцов с соответствующим количеством градуировочных растворов и образцов для контроля качества для их валидации. В один день может быть проведено несколько циклов; один цикл может длиться в течение нескольких дней;
«верхняя граница определяемых концентраций» (upper limit of quantification (ULOQ)) – наибольшее количество анализируемого
вещества в образце, которое поддается количественному определению с
заранее заданной правильностью и прецизионностью;
«внутренний стандарт (ВС)» (internal standard) – контрольное соединение (например, структурно схожий аналог или соединение, меченное стабильным изотопом), добавляемое к градуировочным растворам, образцам для контроля качества и испытуемым образцам в заранее установленных постоянных концентрациях с целью поправки на экспериментальную вариабельность при пробоподготовке и анализе образцов;
«градуировочный раствор (стандарт)» (calibration standard) – биологический образец, к которому добавили известное количество анализируемого вещества. Градуировочные растворы (стандарты) используют для построения градуировочной кривой;
«нижний предел количественного определения (НПКО)» (lower limit of quantification (LLOQ)) – наименьшее количество анализируемого вещества в образце, которое поддается количественному определению с заранее заданной правильностью и прецизионностью;
«номинальная концентрация» (nominal concentration) – теоретическая или ожидаемая концентрация;
«образец для контроля качества (КК)» (quality control (QC) sample) – образец, содержащий анализируемое вещество, используемый для оценки пригодности биоаналитической методики и оценки целостности и правильности результатов анализа испытуемых образцов в неизвестной концентрации из одной серии;
«перекрестная валидация» (cross
Документированное подтверждение того, что процесс, проводимый в пределах установленных параметров, может осуществляться эффективно и с воспроизводимыми результатами.validation) – сравнение валидационных параметров двух биоаналитических методик;
«повторный анализ активных испытанных образцов» (incurred sample reanalysis) – анализ части активных испытанных образцов с целью определения, насколько сопоставимы результаты первичного анализа;
«полная валидация» (full validation) – определение валидационных параметров, подлежащих использованию для анализа каждого анализируемого вещества в образце с помощью биоаналитической
методики;
«правильность» (accuracy) – выражает близость полученных с помощью методики значений к номинальным концентрациям анализируемого вещества. Правильность оценивается по величине процентной меры правильности, рассчитанной как полученное значение
100 %, и по относительной величине систематической погрешности;
«прецизионность» (precision) – степень разброса между сериями измерений, проведенных в заранее установленных условиях. Прецизионность характеризуется величиной относительного стандартного отклонения (отношение стандартного отклонения к среднему, выражаемое в процентах);
«селективность» (selectivity) – способность биоаналитической методики определять и различать исследуемое анализируемое вещество и внутренний стандарт в присутствии компонентов, которые могут содержаться в образце;
«специфичность» (specificity) – способность биоаналитической методики однозначно определять анализируемое вещество в присутствии других соединений (эндогенных или экзогенных) в биологическом образце;
«стабильность» (stability) – химическая стабильность анализируемого вещества в определенном образце в определенных условиях в течение определенного периода;
«стандартная операционная процедура» (Standard Operating Procedure) – документ, в котором содержится описание регулярно осуществляемых операций, значимых для качества исследования, и позволяющий проводить их правильно и единообразно;
«функция отклика» (response function) – функция, которая надлежащим образом описывает зависимость аналитического сигнала (например, площади пиков) от концентрации (содержания) анализируемого вещества в образце. Функция отклика определяется для аналитического диапазона;
«частичная валидация» (partial validation) – серии аналитических экспериментов, в которых после модификации валидированной биоаналитической методики часть параметров подвергаются валидации;
«эффект матрицы» (matrix effect) – прямое или непрямое влияние или воздействие на результаты анализа, обусловленные наличием в биологическом образце непредусмотренных анализом анализируемых веществ или иных влияющих на него веществ;
«эффект переноса» (carry over) – появление сигнала анализируемого вещества в холостом образце после проведения анализа образца с высокой концентрацией анализируемого вещества;
«якорные калибраторы» (anchor calibrators) – стандартные точки вне диапазона количественного определения, используемые с целью подбора нелинейной регрессии стандартной кривой в методах связывания лиганда.
3. Измерение концентрации действующего вещества в биологических образцах (например, сыворотке, плазме, крови, моче и слюне) — важный аспект разработки лекарственного препарата. Поэтому в целях получения надежных результатов используемые биоаналитические методики должны быть хорошо описанными, полностью валидированными и документированными. В особых ситуациях допускается использовать более широкие, чем описанные в настоящих Требованиях, критерии приемлемости. В этом случае, основываясь на предполагаемом использовании методики, их следует установить предварительно.
4. Методы количественного определения концентрации биомаркеров, используемых в качестве фармакодинамических маркеров, в настоящих Требованиях не рассматриваются.
